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发布日期: 2019-02-12
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  Hyclone胎牛血清在大部分的细胞培养中是不需要灭活的,但在免疫学研究中,培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。Hyclone胎牛血清有较好的促细胞生长作用及产品稳定性。内毒素含量小于10EU/ml,血红蛋白含量小于10mg/dl。此血清可以广泛用于细胞培养,包含干细胞系的培养。
  Hyclone胎牛血清保存方法:
  1、需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会被破坏,而影响血清质量。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
  2、一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现Hyclone胎牛血清有悬浮物,则可将Hyclone胎牛血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤Hyclone胎牛血清。
  3、瓶装Hyclone胎牛血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。
  4、热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。
  5、血清(例如:Hyclone南美血清)中的沉淀物絮状物:主要是Hyclone胎牛血清中的脂蛋白变性及解冻后Hyclone胎牛血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理。 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清(例如:Hyclone南美血清)质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。
  HyClone胎牛血清具有极为重要的作用,其包括:
  1、提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
  2、提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
  3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
  4、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
  5、起酸碱度缓冲液作用。
  6、提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
  Hyclone胎牛血清是品质的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分较少。
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